의과학 | 혈액과 식물로부터 DNA추출 2 (추출된 DNA확인)
페이지 정보
작성자 캠프 담당자 작성일17-11-02 17:11 조회10,670회 댓글0건본문
국립중앙과학관 세종과학실험 토론캠프
혈액과 식물로부터 DNA추출
1.실험목표
마우스로부터 얻은 혈액을 이용하여 혈액 특징을 이해하고, 식물과 혈액으로부터 추출된 DNA의 구조 및 활용성을 알아본다.
2. 실험재료
마우스 혈액, DNA extraction kit, TAE, Agarose LE, gelred, DNA ladder, 로딩 dye, PBS, 에탄올, 증류수, 아세트올세인, 소금 1kg, 바나나, 주방세제(트리오)
3. 실험기구
전자렌지, 전자저울, 약수저, 삼각플라스크, 온도계, 항온수조, microtube centrifuge, 전기영동장치, uv detector, 마이크로파이펫&팁, etube, etube rack, 킴와이프스, 라텍스글러브, 필터페이퍼 유산지, 나무젓가락, 막자사발, 비이커, 거즈
4. 실험방법
< DNA 확인 1 >
1. 추출된 DNA를 piper을 이용하여 거름종이에 5μl, 10μl, 20μl 묻혀서 스며들게 한 뒤, 잘 말린다.
2. 0.2% 아세트올세인 염색약(원액을 5배 희석)에 15분 정도 넣어둔다.
3. 비커에 물을 끓여 열탕에서 5분간 여분의 아세트올세인 용액을 제거한다. 탈색 후 색을 관찰한다.
< DNA 확인 2 - Gel 전기영동>
1. 1%의 gel을 만들기 위해서 5ml의 1XTAE에 0.05g의 Agarose gel가루를 넣고 전자레인지에 1분 정도 돌려 투명하게 녹인다.
사진1. agarose를 hot plate에서 녹이는 모습이다.
2. 투명하게 녹은 gel에 gel red를 넣고 공기방울이 생기지 않도록 조심하며 gel 성형 틀에 붓는다. gel의 위쪽에 콤을 끼워준 후 gel이 굳을 때까지 15분 정도 기다린다.
사진2. 녹은 agarose에 gel red를 넣고 틀에 부은 모습이다.
3. 전기영동 기기에 1XTAE를 채운 뒤 굳은 gel을 넣어준다. 제일 앞 홈에 DNA size marker를 1μl 넣고 순서대로 roading dye 2ul와 추출한 DNA 10μl을 잘섞은후 로딩한다..
4. 100V에서 30분 전기영동 한다. 전기영동 중간에 직접 눈으로 각각의 홈에서 증폭산물이 아래로 내려오는 것을 확인 할 수 있다.
5. 전기영동이 끝나면 gel을 gel tray에 담아 UV light기에서 DNA 추출여부를 확인하고 첫 줄의 사이즈마커와 비교하여 그 사이즈를 추측한다. 또한 사이즈마커와 비교하여 어떤형태로 전기영동됐는지 비교해본다.
사진3. 전기영동 후 밴드를 확인하는 모습이다.
댓글목록
등록된 댓글이 없습니다.
